1. Hücre kültürü nedir?
Hücre kültürü, hücrelerin hayvanlardan veya bitkilerden alınması ve daha sonra uygun bir yapay ortamda büyütülmesi anlamına gelir.Hücreler doğrudan dokudan alınabilir ve kültürlenmeden önce enzimatik veya mekanik yollarla parçalanabilir veya yerleşik hücre hatlarından veya hücre hatlarından türetilebilir.
2. Birincil kültür nedir?
Birincil kültür, hücreler dokudan ayrıldıktan ve mevcut tüm substratları işgal edene kadar (yani, bir araya gelene kadar) uygun koşullar altında çoğaldıktan sonraki kültür aşamasını ifade eder.Bu aşamada, hücrelerin sürekli büyüme için daha fazla alan sağlamak üzere taze büyüme ortamı içeren yeni bir kaba aktarılarak alt kültürleri yapılmalıdır.
2.1 Hücre hattı
Birinci alt kültürden sonra, birincil kültüre hücre çizgisi veya alt klon adı verilir.Birincil kültürlerden türetilen hücre dizilerinin sınırlı bir ömrü vardır (yani, sınırlıdırlar; aşağıya bakınız) ve bunlar geçerken, en yüksek büyüme kapasitesine sahip hücreler hakim olur ve bu da popülasyonda fenotiple ısrar eden belirli bir genotip derecesi ile sonuçlanır.
2.2 Hücre suşu
Bir hücre hattının bir alt popülasyonu, klonlama veya başka bir yöntemle kültürden pozitif olarak seçilirse, hücre hattı bir hücre suşu haline gelir.Hücre suşları genellikle ebeveyn soyu başladıktan sonra ek genetik değişiklikler kazanır.
3.Sınırlı ve sürekli hücre hatları
Normal hücreler genellikle çoğalma yeteneğini kaybetmeden önce yalnızca sınırlı sayıda bölünürler.Bu, yaşlanma adı verilen genetik olarak belirlenmiş bir olaydır;bu hücre dizilerine sonlu hücre dizileri denir.Bununla birlikte, bazı hücre dizileri, kendiliğinden meydana gelebilen veya kimyasallar veya virüsler tarafından indüklenebilen dönüşüm adı verilen bir süreçle ölümsüz hale gelir.Sonlu bir hücre çizgisi dönüşüme uğradığında ve süresiz olarak bölünme yeteneği kazandığında, sürekli bir hücre çizgisi haline gelir.
4.Kültür durumu
Her hücre tipinin kültür koşulları çok farklıdır, ancak hücrelerin kültürlenmesi için yapay ortam her zaman aşağıdakileri içeren uygun bir kaptan oluşur:
4.1 Temel besinleri (amino asitler, karbonhidratlar, vitaminler, mineraller) sağlayan substrat veya kültür ortamı
4.2 Büyüme faktörleri
4.3 Hormonlar
4.4 Gazlar (O2, CO2)
4.5 Düzenlenmiş fiziksel ve kimyasal ortam (pH, ozmotik basınç, sıcaklık)
Çoğu hücre ankraj bağımlıdır ve katı veya yarı katı bir substrat (yapışkan veya tek katmanlı kültür) üzerinde kültürlenmelidir, diğer hücreler ise ortam içinde yüzerek büyüyebilir (süspansiyon kültürü).
5. Kriyoprezervasyon
Alt kültürde fazla hücre varsa, bunlar uygun bir koruyucu maddeyle (DMSO veya gliserol gibi) işlenmeli ve ihtiyaç duyulana kadar -130°C'nin altındaki bir sıcaklıkta saklanmalıdır (kriyoprezervasyon).Hücrelerin alt kültürü ve kriyoprezervasyonu hakkında daha fazla bilgi için.
6.Kültürdeki hücrelerin morfolojisi
Kültürdeki hücreler, şekillerine ve görünümlerine (yani morfolojilerine) göre üç temel kategoriye ayrılabilir.
6.1 Fibroblast hücreleri iki kutuplu veya çok kutupludur, uzun bir şekle sahiptir ve substrata bağlı olarak büyür.
6.2 Epitel benzeri hücreler poligonaldir, daha düzenli bir boyuta sahiptir ve matrise ayrı tabakalar halinde bağlıdır.
6.3 Lenfoblast benzeri hücreler küreseldir ve genellikle yüzeye tutunmadan süspansiyon halinde büyürler.
7. Hücre kültürü uygulaması
Hücre kültürü, hücre ve moleküler biyolojide kullanılan ana araçlardan biridir.Hücrelerin normal fizyolojisini ve biyokimyasını (metabolik araştırma, yaşlanma gibi), ilaçların ve toksik bileşiklerin hücreler üzerindeki etkilerini ve mutajenez ve kanserojen etkileri incelemek için mükemmel bir model sistem sağlar.Ayrıca ilaç tarama ve geliştirme ve biyolojik bileşiklerin (aşılar, terapötik proteinler gibi) büyük ölçekli üretimi için de kullanılır.Bu uygulamalardan herhangi biri için hücre kültürü kullanmanın ana avantajı, bir dizi klonlanmış hücre kullanılarak elde edilebilecek sonuçların tutarlılığı ve tekrarlanabilirliğidir.
Gönderim zamanı: Haz-03-2019